一、实验器材及试剂
1、实验器材
名称 厂家 型号
冰冻切片机 Thermo CRYOSTAR NX50
切片刀 上海徕卡仪器有限公司 LEICA 819
防脱载玻片 Servicebio
2、主要实验试剂
试剂 厂家 货号
OCT包埋剂
固定液
蔗糖 Sakura
Servicebio
国药集团化学试剂有限公司 4583
G1101
57-50-1
二、冰冻切片制作
1、组织固定：新鲜组织固定液固定24h以上，将组织从固定液取出用手术刀将目的部位组织修平整。
2、脱水：将修切好的组织放于15%的蔗糖溶液内4℃冰箱脱水沉底后转入30%的蔗糖溶液内4℃冰箱脱水沉底。
3、OCT包埋：将脱好水的组织取出用滤纸将表面水稍吸干后切面朝上放于包埋台上，组织周围滴上OCT包埋剂，将包埋台放在冰冻切片机的速冻台上速冻包埋，OCT变白变硬后即可进行切片。新鲜组织直接冰冻切片则不需要固定脱水，直接用手术刀将目的部位组织修平整OCT包埋剂包埋切片。
4、切片：将包埋台固定于切片机上，先粗切将组织面修切平整后即可开始切片，切片厚度8-10μm，将干净的载玻片平放于切出的组织片上方即可将组织贴于载玻片上。片子写好标签后-20℃保存备用。
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