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广州竞远生物科技有限公司
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| 细胞水平实验（4） |
细胞克隆形成实验
服务简介
细胞克隆形成率即细胞接种存活率，表示接种细胞后贴壁的细胞成活并形成克隆的数量。贴壁后的细胞不一定每个都能增殖和形成克隆，而形成克隆的细胞必为贴壁和有增殖活力的细胞。克隆形成率反映细胞群体依赖性和增殖能力两个重要性状。
应用
如要观察外源基因表达后较短时间内就能检测的细胞功能，可使用瞬时转染/感染。即在转染后24至96小时内收获细胞;如需要长期观察外源基因表达的作用，进行长期药理学研究、基因治疗研究、遗传调控机制研究或需要进行大规模蛋白合成则需要构建稳转株
实验流程
1.取对数生长期的各组细胞，分别用0.25％胰蛋白酶消化并吹打成单个细胞，并把细胞悬浮在10％胎牛血清的DMEM培养液中备用。
2.将细胞悬液作梯度倍数稀释，每组细胞分別别以每50、100、200个细胞的梯度密度分別接种含10mL37C预温培养液的皿中并轻轻转动，使细胞分散均匀。置37C5％C02及饱和湿度的细胞培养箱中培养2～3周。
3.经常观察，当培养皿中出现肉眼可见的克隆时，终止培养。弃去上清液，用PBS小心浸洗2次。加4％6多聚甲醛固定细胞5mL固定15分钟。然后去固定液，加适量 GIMSA应用染色液染10～30分钟，然后用流水缓慢洗去染色液，空气干燥。
4.将平皿倒置并叠加一张带网格的透明胶片，用肉眼直接计数克隆，或在显徴镜(低倍镜)计数大于10个细胞的克隆数。*后计算克隆形成率。克隆形成率=(克隆数/接种细胞数)×100％
细胞黏附实验
服务简介
细胞黏附性是维持组织结构稳定的基本条件，也是细胞运动和发挥功能的调节因素，并且对细胞的增殖、分化有重要影响。通常可分为两类，即细胞与细胞黏附和细胞与基质黏附。机体内许多细胞，如上皮细胞，需要牢固地定在某处发挥功能;另一些细胞，如白细胞，活跃运动，就需要不断调节细胞黏附。细胞黏附性的改变在肿瘤转移过程中也发挥着重要作用。恶性肿瘤具有从原发瘤分离及在体内扩散的能力，提示这些细胞在相互识别及黏附机制方面发生了改变。
血管形成实验
服务简介
在原有的毛细血管和(或)微静脉基础上通过血管内皮细胞的迁移和增殖，从已存在的血管处以芽生或非芽生(套迭)形式形成新的、以毛细血管为主的血管系统过程称之为血管生成，通过体外模拟血管生成的过程对研究血管形成机制、发现促进或抑制血管生成药物十分重要。 |
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